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凝血酶原時間(PT)檢測試劑盒產品說明書(中文版)

發表時間:2021-09-07  |  點擊率:503

凝血酶時間(PT檢測試劑盒產品說明書(中文版)

 

主要用途

 

  凝血酶時間(PT檢測試劑是一種旨在通過組織因子替代反應物,與血漿樣品混合,加入鈣離子啟動凝血反應,產生凝塊,通過分光光度儀檢測,來測定樣品中凝塊形成時間的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物和人體血漿樣品凝血系統的檢測,以及凝血因子和抑制劑的的篩選。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。

 

技術背景

 

凝血酶原時間(thromboplastin time;PT)是指血漿在組織凝血活酶(人腦、兔腦、胎盤及肺組織等制品的浸出液)和鈣離子等的參與下,使凝血酶原變為凝血酶,后者使纖維蛋白原轉變為纖維蛋白,形成血漿纖維蛋白凝塊(fibrin clot)所需的時間長度。其反映和檢測血液系統外源性(extrinsic)或稱常見(common)凝血通路或機制的生理或病理狀況。外源性凝血通路或機制由凝血因子2、7、5、10、1等構成。正常凝血酶原時間通常為1115秒。凝血酶時間用于篩選出血傾向的病人,即外源性凝血系統異常的病人;定量檢測凝血因子1、2、5、7、10、凝血酶原(prothrombin)、纖維蛋白原(fibrinogen)等差異和缺陷;檢測血液病理性凝血抑制劑,例如狼瘡抗凝物(lupus anticoagulant;LA);監測華法林Warfarin抗凝血療法和凝血因子替代療法。維生素K缺乏、肝病、低(無)纖維蛋白原血癥 、遺傳性無纖維蛋白原血癥(congenital afibrinogenemia)、凝血因子5缺陷、阻塞性黃疸、淀粉樣紫癜amyloid purpura)、肝素、狼瘡抗凝物等導致凝血酶時間延長;而口服避孕藥、高凝狀態和血栓性疾病等則引起凝血酶時間縮短。其檢測方法在于使用枸櫞酸抗凝后的血漿組織因子(來自于人胎盤促凝血酶原激酶(human placental thromboplastin)等,混合在一起,加熱孵育后加入鈣離子后啟動凝血反應。

 

產品內容

 

  抗凝液(Reagent A          毫升

  反應液(Reagent B            

  稀釋液(Reagent C           毫升

  標準液(Reagent D            微升(另購)

產品說明書                1

 

保存方式

 

保存  標準液(Reagent D-20冰箱里;其余的保存在4冰箱里;  反應液(Reagent B一旦啟用,保存在-20冰箱里;有效保證3 

 

用戶自備

 

2毫升離心管:用于樣品操作的容器

1.5毫升離心管:用于樣品反應的容器

微型臺式離心機:用于樣品操作

培養箱或恒溫水槽:用于反應物孵育

計時器:用于反應計時

比色皿:用于樣品凝血儀測定的容器

凝血儀:用于樣品凝塊形成分析

 

實驗步驟

 

一、 血漿制備

 

1. 準備好2毫升離心管(注意:1小時內完成后續操作)

2. 加入xx微升  抗凝液Reagent A 

3. 抽取xx毫升血液  抗凝液Reagent A的離心管

4. 放進微型臺式離心機離心10分鐘,速度為3000g 

5. 小心移取上層黃色液體到新的2毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層

6. 即刻置于冰槽里備用(注意:2小時內使用)

 

二、 測定準備

 

1. 準備好上述制備的血漿樣品

2. 設定好凝血并預熱

3. 實驗開始前,移出xx毫升  稀釋液(Reagent C  反應液(Reagent B管里,混勻后,標記為  反應工作液,然后移出200微升到新的1.5毫升離心管,置于37恒溫培養箱里孵育30分鐘,其余的即刻放進-20保存備用

 

三、 凝血測定(手工操作)

 

1. 準備好11.5毫升離心管

2. 加入100微升上述制備的待測樣品,混勻

3. 放進37培養箱里孵育3分鐘(注意:不宜超過5分鐘)

4. 即刻加入上述孵育的200微升  反應工作;同時開啟計時器進行計時(注意:以秒計時)

5. 傾斜離心管觀察凝塊形成,直至液體凝固;同時關閉計時器結束計時

6. 正常參考范圍:

手工操作:1115

凝血儀操作:1013

7. 其它參數計算公式:

 

 

注意事項

 

1. 本產品為20次操作,包括標準對照測定

2. 操作時,須戴手套

3. 血液采集,避免使用肝素、EDTA抗凝管

4. 樣品避免溶血,采血避免損傷組織

5. 溶血、脂血、腸胃外喂養(parenteral feeding)樣品或血漿中含有肝素、纖維蛋白(fibronogen)、狼瘡抗凝物(lupus anticoagulant;LA、水蛭素Hirudin)等則干擾檢測

6. 血漿樣品避免反復凍融:4環境維持4小時;-20維持2月;-80維持6

7.   標準液(Reagent D為標準對照血漿

8. 建議用戶使用正常對照樣品,建立自己的正常參考值范圍

9. 用戶可以使用各種自動和半自動凝血儀:例如Sysmex CA 7000等進行檢測,按照儀器操作手冊操作

10. 用戶可以使用660nm波長的光度儀進行檢測

11. 本公司提供系列血液凝集檢測試劑產品

 

質量標準

 

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定檢測敏感

 

 


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